CUT&Tag信号分布图显示我的目标蛋白结合在转录起始位点(TSS)附近,但具体调控哪些基因区域以及各区域占比如何呢?
虽然我可以使用CUT&Tag富集图调整功能富集结果图,可是如果我想重新挑选基因集合进行功能富集怎么做呢?
——答案就在本期新工具,从'看到现象'到'解释机制',完整解锁CUT&Tag数据的生物学意义!
01
CUT&Tag注释图:揭示目标蛋白基因结合区域与调控机制
CUT&Tag可精确鉴定蛋白质(如转录因子、组蛋白修饰)在基因组上的结合位点(Peak),而结合在基因不同区域的目标蛋白,会通过不同的作用机制调控基因表达,Peak的功能性区域注释有助于我们比较不同目标蛋白的调控机制。
在CUT&Tag交付报告中,我们通过R包ChipSeeker对各样本鉴定Peak及各比较组差异Peak均进行了基因区域注释及图片可视化,进一步,可以使用云工具“CUT&Tag注释图”进行Peak注释图片的个性化修改,包括:
1)将不同范围的promoter区进行合并,或仅保留Promoter、Exon、Intron、Distal Intergenic这些经典基因组功能区域分类;
2)修改可视化展示类型,支持常规饼图、3D饼图、环图,满足多元性需求;
3)细节优化,支持图片中的字体大小、颜色设置和图片大小调整等,让您的图表更加美观专业。
02
CUT&Tag富集分析:揭示基因功能与代谢通路变化
1)自定义一个基因集(仅支持gene Symbol),对该基因集进行功能富集;
2)对参与富集的Peak注释基因按照类别进行筛选(如选择promoter、exon、intron、distal等)后进行功能通路富集分析;
3)调整气泡图与条形图中展示显著富集通路的阈值,推荐qvalue<0.05;
4)重新富集结果可进一步使用“CUT&Tag富集图”(上次推文链接)进行图形优化。
03
CUT&Tag富集分析-结果说明
1)KEGG所有富集结果表,可作为“CUT&Tag富集图”输入文件进行图形优化;
2)经过富集结果显著性阈值筛选后的富集通路条形图(如显著富集通路大于20条,则仅展示按qvalue升序排列后的top20通路);
3)经过富集显著性阈值筛选后的富集通路气泡图(如显著富集通路大于20条,则仅展示按GeneRatio降序排列后的top20通路);
04
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何慧敏