蛋白质是功能的执行者，蛋白质的表达、修饰和功能的异常是疾病发生的直接原因。近年来，随着质谱技术的发展，蛋白质组也在向着“深度覆盖”和“高通量”两个方向发展，并在基础研究和临床转化方面发挥了越来越重要的作用。

区别于追求在单个样品中检测到更多蛋白或修饰位点的“深度覆盖（deep-coverage）”的概念，“高通量（high-throughput）”的蛋白质组学分析方法追求的是蛋白质组学检测的效率。常规的蛋白质组技术一天只能检测十几个，甚至是个位数的样本。而高通量的蛋白质组学方法在保持了较为理想的检测深度和平行性、可靠性的前提下，能够实现短时间的快速分析，并且能够显著降低“批次效应”带来的系统误差，对于大队列临床样本和作物群体的研究尤为关键。

“高通量”的技术在基因测序领域已经实现了充分的发展，而蛋白质组方面则有所欠缺，这也是制约了蛋白质组技术大规模应用的主要原因。可喜的是，近年来在色谱、质谱等方面都取得了一系列的突破，诸多创新技术的应用，为实现真正的“高通量”蛋白质组奠定了基础。

色谱篇

单针短梯度的方式，是提升通量的必由之路。传统的色谱技术中，首先色谱柱的分离能力有限，短梯度难以实现有效分离；再者在样品洗脱前需要经历吸样、柱平衡和上样的过程，导致有效梯度时间缩短。

最新的Evosep色谱分离系统能够有效改善这一现状，其使用的Evotip移液器吸头形式的一次性捕获柱，配合其独特的高/低压泵系统，具有如下优势：

1）Evotip能够在柱平衡的同时，实现样本的快速上样和在线脱盐，有效提高了质谱采集效率。

2）综合Evotip和梯度预存储技术，Evosep色谱柱上的残留极低，提升了色谱柱的使用寿命和系统的利用率，减少样品间交叉污染。

3）独特的高/低压泵系统，低压力下完成上样、预洗脱并形成梯度，高压力下进行洗脱分离，提高了系统稳定性和结果重现性。

图1 Evosep One高通量蛋白质组学分离系统的结构原理

质谱篇

传统质谱技术存在分离能力不足和扫描速度慢的问题，无法适应极端复杂的蛋白质组解析的需求。传统质谱本身只能在m/z水平做分离检测，因此其分离很大程度上需要前端的LC做预分级。

而随着以timsTOF Pro为代表的4D蛋白质组平台的出现，将离子淌度（ion mobility）引入质谱系统中，增加了全新的分离维度，使得质谱本身具备了强大的分离能力，也就不再需要在色谱上做二维的分离了。此外，依托于TOF极高的扫描速度，能够将分离后的大量信号进行快速的检测。

4D蛋白质组平台具有如下的优势：

1）单针实现传统方法多针合并的检测深度，极大提高效率。

2）灵敏度提升，适用于切片、穿刺等微量样本。

3）4D的在提高了检测深度的同时提高了可靠性。

图2 timsTOF Pro能够实现>100Hz的超快扫描速度

整合优势，再度升级，景杰生物独家率先推出“h4D-DIA”高通量蛋白组技术。

“h4D-DIA”高通量蛋白组技术，在原有的4D-DIA基础上，融合了基于Evosep One的高效色谱分离技术。在保持了较为理想的检测深度和平行性、可靠性的前提下（图3），检测效率提升三倍，实现快速的高通量蛋白组分析，特别适用于大队列临床样本和作物群体的研究。

图3 h4D-DIA出色的检测效率和数据重现性*

如果您想了解更多信息，请咨询景杰生物销售工程师或拨打科服热线（400-100-1145）。

*不同样品类型的检测结果以实际情况为准

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